pbs最新动态解析_pbs官网(2024年12月话题讨论)
免疫荧光共染全攻略,让你的实验更炫酷! 蠨准备:1xPBS、4%多聚甲醛;0.1% Triton-100;5%血清封闭液;一抗、二抗、DAPI 1️⃣ 用1xPBS清洗样品3次,每次3分钟。 2️⃣ 将样品用4%多聚甲醛固定20分钟,然后用1xPBS清洗3次,每次3分钟。 3️⃣ 加入0.1% Triton-100,孵育10分钟,接着用1xPBS清洗3次。 4️⃣ 用5%山羊血清封闭样品,37度孵育1小时。 5️⃣ 吸取封闭液,加入一抗和二抗,4度过夜。 6️⃣ 用1xPBS清洗样品3次,每次5分钟。 7️⃣ 加入二抗,室温孵育1小时,然后用1xPBS清洗3次,每次5分钟。 8️⃣ 加入DAPI,染色1分钟后吸出,再用1xPBS清洗。 通过以上步骤,你可以轻松完成免疫荧光共染,让你的实验结果更加清晰、美观!
实验室缓冲液大揭秘! 嘿,大家好!今天咱们来聊聊那些在实验室里让人傻傻分不清的缓冲液:TBS、TBST、PBS、PBST。相信很多小伙伴都有过这样的困惑吧?别担心,看完这篇文章,你一定能搞清楚它们的区别! TBS(Tris缓冲盐水) 首先,咱们来说说TBS。TBS其实就是Tris-HCl缓冲盐溶液的简称。它主要由Tris和NaCl组成。Tris提供缓冲能力,能保持溶液在弱碱性环境下稳定;而NaCl则负责调节渗透压,让它接近生理条件。TBS在免疫测定、免疫组织化学染色、原位杂交、Western blot等实验中可是个大明星,广泛用作洗涤缓冲液或抗体稀释剂。 配方也很简单:每1000ml需要6.05克Tris base和85.0克NaCl,用HCl调整pH值到7.4-7.6。 PBS(磷酸盐缓冲液) 夸来是PBS。PBS是一种以磷酸盐为主要成分的缓冲溶液,主要用于维持生物样品或实验体系中的pH稳定和渗透压平衡。它的主要成分包括KH2PO4、Na2HPO4、NaCl,有时候还会加点KCl。PBS的pH值相对稳定,常用于细胞实验、免疫染色等作为缓冲液或者洗涤液。 配方也很直观:每1000ml需要1.42克NaH2PO4、8.77克Na2HPO4和90.0克NaCl,用NaOH调整pH值到7.2-7.4。 TBST(含Tween 20的Tris缓冲盐水) 𖥐是TBST。TBST是在TBS的基础上添加了Tween 20这一成分而得到的缓冲溶液。Tween 20是一种非离子型表面活性剂,能增强洗涤效果。它在Western blot实验中特别有用,能去除非特异性结合的抗体。 配方和TBS差不多,只是多加了一毫升Tween 20。 PBST(含Tween 20的磷酸盐缓冲液) 后是PBST。PBST是在PBS的基础上添加了Tween-20而得到的混合溶液。它在生物化学实验中的洗涤步骤中非常有用,能去除未结合的试剂,降低背景噪声,提高实验结果的信噪比。 配方也很简单:每1000ml PBS加上一毫升Tween-20。 总结 总的来说,这些缓冲液在生物化学实验中都有各自的作用,但它们都含有维持溶液等渗的NaCl成分。希望这篇文章能帮你搞清楚它们的区别,下次再也不怕搞混啦! 如果你还有什么疑问,欢迎在评论区留言哦!
细胞生物实验——PBS溶液配置 事先计算试剂用量,使用称量天平进行试剂量取,量取试剂量较少时,可轻抖手臂让粉末少量取定量超纯水在雏形瓶中溶解试剂粉末,放入干净转子,在磁力搅拌器上搅拌溶解试剂粉末,完全溶解后使用PH计,进行测定。 如该溶液的ph,在7.2-7.4范围内,不需要调节ph,取一只定容瓶进行验漏,超纯水润洗干净,使用干净玻璃棒将溶液引流入定容瓶,使用超纯水冲洗锤形瓶,将溶液引流入定容瓶,静置片刻,待定容瓶降至室温。 使用超纯水定容至刻度线,刻度线与液面下凹面齐平,分装PBS溶液,放入高压灭菌锅进行灭菌。 #广州华韵生物科技有限公司#
生物实验缓冲液,一文懂透! 大家好,今天我们来聊聊生物化学实验中的缓冲液! PBS(磷酸盐缓冲液)有多种类型,包括无菌和非无菌的,磷酸盐浓度的差异以及是否含钾离子。以赛维尔的三款PBS为例,详细讲解一下: 1㗐BS(G4202)(0.01M磷酸盐,无菌):经过0.1 过滤除菌,适用于组织或细胞的洗涤、其他试剂的配制以及细胞实验的稀释液等。还适合于细胞培养,但处理时间不要超过30分钟。对于大部分客户来说,G4202可以满足使用要求。 PBS(G4250)(0.0067M磷酸盐,无菌):适合较长时间孵育,表现会更好一些,也可用于一些生物化学研究,作为常用溶剂。 PBS(G2156)(0.01M磷酸盐,不含钾离子):适用于清洗样本、配制试剂等,以及ELISA、WB、IHC、IF等免疫相关实验中的漂洗操作,适用于对磷酸盐浓度有特定要求且不需要钾离子参与的实验。 接下来,对于大部分WB蛋白指标来说,PBST和TBST是可以通用的。 但在检测磷酸化蛋白时,PBST会有一些小问题: ✍𘀦⯼磷酸盐会干扰碱性磷酸酶结合的抗体,还会增加磷酸特异性抗体的背景信号(不过对HRP标记的抗体没影响); 椸方面,磷酸化特异性抗体可能会和PBST中的磷酸盐结合,导致检测到的信号降低。就像有时候抗体孵育缓冲液从TBST改成PBST,可能条带就会变浅甚至消失(在其他条件都不变的情况下)。 所以在实验时,大家要根据具体情况选择合适的缓冲液哦。က
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